Briefly, 20, 000 THP-1 cells were s

Briefly, 20, 000 THP-1 cells were seeded in 300 μL of
phenol red-free RPMI-1640® medium (Life Technologies)
with PMA at 162 nM (to promote differentiation) in ibiTreat
microscopy chambers (ibidi) for 48 h at 37°C in
5% CO2/95% air. After 48 h of differentiation, cells were
washed twice with PBS to remove all the PMA and
treated with EAH at 1 mg/mL for 24 h. Cells were
washed three times with PBS and fixed with 4% paraformaldehyde
aqueous solution (Electron Microscopy
Sciences) for 30 min at room temperature, washed
three times 5 min each with PBS, and permeabilized
with 0.1% Triton X-100 in PBS for 15 min at room
temperature.

Resultados (español) 1:

Brevemente, 20, 000 células THP-1 fueron sembradas en 300 μL deMedio RPMI-1640 ® sin rojo de fenol (Life Technologies)con PMA en 162 nanómetro (para promover la diferenciación) en ibiTreatcámaras de microscopía (ibidi) durante 48 h a 37° C en5% CO2/95% aire. Después de 48 h de la diferenciación, las células fueronlavó dos veces con PBS para eliminar todos lo PMA ytratados con EAH 1 mg/ml por 24 h. célulaslavadas tres veces con PBS y fijas con paraformaldehído al 4%solución acuosa (microscopia electrónicaCiencias) durante 30 min a temperatura ambiente, lavartres veces 5 minutos cada uno con PBS y permeabilizedcon 0,1% Triton X-100 en PBS durante 15 minutos en la sala detemperatura.

Resultados (español) 2:

Brevemente, 20, 000 células THP-1 fueron sembradas en 300 l de
fenol-1640® medio RPMI libre de rojo (Life Technologies)
con PMA 162 nM en (para promover la diferenciación) en ibiTreat
cámaras de microscopía (ibidi) durante 48 horas a 37 ° C en
5% CO2 / 95% de aire. Después de 48 h de diferenciación, las células se
lavaron dos veces con PBS para eliminar todo el PMA y
tratados con EAH a 1 mg / mL durante 24 h. Las células se
lavaron tres veces con PBS y se fijaron con paraformaldehído al 4%
solución acuosa (Electron Microscopy
Sciences) durante 30 min a temperatura ambiente, se lavó
tres veces 5 minutos cada uno con PBS, y se permeabilizaron
con 0,1% Triton X-100 en PBS durante 15 min en la sala de
la temperatura.

Resultados (español) 3:

Brevemente, 20, 000 celulas THP - 1 fueron sembradas en 300 μl de
Rojo fenol libre medio RPMI - 1640 ® (Life Technologies)
con el PMA en 162 nm (promover la diferenciación) en ibitreat
Microscopy Salas (ibidi) durante 48 horas a 37 °C en
5% de CO2 / 95% de aire.Después de 48 h de diferenciación, las celulas fueron
lavados dos veces con PBS a quitar todos los PMA y
tratados con 1 mg / ml si en 24 h. Células fueron
Lavar tres veces con PBS y se fija con 4% de paraformaldehído
solución acuosa (microscopia electronica
Ciencias) durante 30 min a temperatura ambiente, lavado
3 veces 5 min cada una con PBS, y permeabilizadas
con 0,1% Triton X - 100 en PBS por 15 min a temperatura de habitación
.